Genome e hloekisitsoeng e ka sebelisoa ka kotloloho ho PCR, RT-PCR, enzyme digestion reaction, Southern hybridization le liteko tse ling.
■ Ho hula ka mokhoa o bonolo ebile o potlakile: Lihlahisoa tsa tlatsetso tsa TGuide li ipapisitse le molao-motheo oa tlhoekiso ea acid ea nucleic ka lifaha tsa matla a khoheli, 'me ho ntšoa ha genomic DNA ho ka phetheloa ka metsotso e 44.
■ Liphetho tse tšepahalang: DNA ea genomic e ntšitsoeng ka har'a kit ha e na litšila tse kang RNA le protheine, 'me e ka sebelisoa ka kotloloho bakeng sa PCR kapa fluorescence quantitative PCR.
No Ha ho phenolko ea phenol le chloroform: Ha ho na lintho tse tlholehang tse kotsi 'meleng oa motho tse kang phenol le chloroform tse hlokahalang.
■ Boholo ba sampole e tenyetsehang: 200 μl, 400 μl, 1.2 ml ea mali a felletseng kapa 1-3 ml ea leukocyte e arotsoeng pele e ka ntšoa ka kotloloho ka ho khetha kit e tsamaellanang.
Lihlahisoa tsohle li ka fetoloa bakeng sa ODM / OEM. Bakeng sa lintlha,ka kopo tlanya Customized Service (ODM / OEM)
Liphetho tsa genomic DNA e nkiloeng ho 200 μl mali a felletseng a alafiloeng ka li-anticoagulants tse fapaneng | |
DNA e ile ea qhibiliha ka har'a 200 μl elution buffer. M: lere la 1 kb 1-5 Ho lemoha li-inhibitors tsa li-anticoagulants tse fapaneng. Liphatsa tsa lefutso: Cbl-b gene, 1.7 kb P: Taolo e nepahetseng |
Liphetho tsa genomic DNA e ntšitsoeng ho 400 μl kapa 600 μl mali a felletseng | |
DNA e ile ea qhibiliha ka 100 μl elution buffer Genomic DNA e ntšitsoeng maling a 400 μl kapa 600 μl M: Letšoao la DL15000 Loading bophahamo ba modumo: 2 μl |
Liphetho tsa genomic DNA tse ntšitsoeng maling a 1,2 ka ho feletseng | |
DNA e ile ea qhibiliha ka har'a buffer ea 300 μl elution Genomic DNA e ntšitsoe maling a felletseng a 1.2 ml M: Letšoao la DL15000; Loading bophahamo ba modumo: 2 μl |
A-1 Lisele tsa vaerase kapa vaerase e tlase sampoleng e qalang -E ruisa bongata ba lisele kapa livaerase.
A-2 Lysis e sa lekanang ea lisampole -Sampole ha e so tsoakane hantle le buffer ea lysis. Ho khothalletsoa ho kopanya ka botlalo ka pulse-vortexing makhetlo a 1-2. —Leseli e sa lekanang ea lisele e bakoang ke ho fokotseha ha tšebetso ea proteinase K. Ho khothalletsoa ho seha lisele ka likotoana tse nyane ebe o eketsa nako ea ho hlapa ho tlosa masalla a lysate.
A-3 Phatlalatso e sa lekaneng ea DNA. -Ha ho ethanol kapa liperesente tse tlase ho e-na le 100% ea ethanol e ileng ea eketsoa pele lysate e fetisetsoa ho kholomo ea spin.
A-4 Boleng ba pH ba elution buffer bo tlase haholo. - Fetola pH hore e be lipakeng tsa 8.0-8.3.
E setseng ea ethanol ka eluent.
-Ho na le masalla a hlatsoang sesupa-tsela PW lehloeng. Ethanol e ka tlosoa ka ho kenya centrifuging spin ea kholomo bakeng sa 3-5 min, ebe e beha mocheso oa kamore kapa 50 ℃ incubator bakeng sa 1-2 min.
A-1 Sampole ha e ncha. —Khetholla sampole e ntle ea DNA e le taolo ea ho bona hore na DNA e samporeng e senyehile.
A-2 Pele ho kalafo e fosahetseng. —E bakoa ke ho sila metsi a naetrojene e feteletseng, ho fumana mongobo hape kapa sampole e ngata haholo.
Li-prereatment li lokela ho fapana bakeng sa mehlala e fapaneng. Bakeng sa mehlala ea semela, etsa bonnete ba hore u sila ka botlalo ka naetrojene ea metsi. Bakeng sa disampole tsa liphoofolo, homogenate kapa sila ka botlalo ka naetrojene ea metsi. Bakeng sa mehlala e nang le mabota a sele eo ho leng thata ho e roba, joalo ka baktheria ea G + le tomoso, ho kgothaletswa hore ho sebelisoe lysozyme, lyticase kapa mekhoa ea mochini ho roba mabota a sele.
4992201/4992202 Plant Genomic DNA Kit e sebelisa mokhoa o sebelisang kholomo o hlokang chloroform bakeng sa ho ntšoa. E loketse haholo-holo mefuta e fapaneng ea limela, hammoho le phofo e ommeng ea semela. Hi-DNAsecure Plant Kit le eona e thehiloe holima kholomo, empa ha ho hlokahale hore e ntšoe phenol / chloroform, ee boloke e se na chefo. E loketse limela tse nang le polysaccharides e phahameng le polyphenol. 4992709/4992710 DNAquick Plant System e sebelisa mokhoa o sebelisang metsi. Phenol / chloroform ha e hlokehe hape. Tsamaiso ea tlhoekiso e bonolo ebile e potlakile e se na moeli bakeng sa litekanyo tsa sampole e qalang, kahoo basebelisi ba ka fetola chelete ka mokhoa o feto-fetohang ho latela litlhoko tsa liteko. Boholo bo boholo ba likhechana tsa gDNA bo ka fumaneha ka chai e ngata.
Ho ntšoa ha DNA ea mali a mali ho ka etsoa ho sebelisoa li-reagents tse fanoeng ka har'a lisebelisoa tsena tse peli ka ho fetola protocol ho latela taelo e ikhethang ea ho ntšoa ha mali a DNA. Kopi e bonolo ea protocol ea ho ntša mali ea clot ea mali e ka fanoa ha ho kopuoa.
Emisa sampole e ncha ka 1 ml PBS, letsoai le tloaelehileng kapa buffer ea TE. Ka ho feletseng homogenize sampole ke homogenizer le bokella precipitate ho ea tlase ea tube, ke centrifuging. Lahla matla a phahametseng tlhaho, 'me u nchafatse sepakapaka ka 200 μl buffer GA. Tlhoekiso e latelang ea DNA e ka etsoa ho latela taelo.
Bakeng sa tlhoekiso ea gDNA ka lisele tsa lero la mali, serum le 'mele, ho khothaletsoa TIANamp Micro DNA Kit. Bakeng sa tlhoekiso ea vaerase gDNA ho tsoa disampoleng tsa serum / plasma, ho khothaletsoa TIANamp Virus DNA / RNA Kit. Bakeng sa tlhoekiso ea baktheria gDNA ho tsoa disampoleng tsa serum le plasma, ho khothaletsoa TIANamp Bacteria DNA Kit (lysozyme e lokela ho kenyelletsoa bakeng sa baktheria e ntle). Bakeng sa mehlala ea mathe, Hi-Swab DNA Kit le TIANamp Bacteria DNA Kit lia khothaletsoa.
Sesebelisoa sa Semela sa DNAsecure kapa Sisteme ea Semela sa DNAquick se khothalelitsoe molemong oa ho ntša fungal genome. Bakeng sa ho ntša tomoso ea genome, ho khothalletsoa TIANamp Yeast DNA Kit (lyticase e lokela ho itokisetsa).
Ho tloha ha e theoa, fektheri ea rona e ntse e nts'etsapele lihlahisoa tsa maemo a pele ka ho latela molao-motheo
ea boleng pele. Lihlahisoa tsa rona li fumane botumo bo botle indastering ebile li na le boleng bo phahameng har'a bareki ba bacha le ba khale ..