■ Setsi sena se ka fihlella litlhokahalo tsa ho qhekella ka letsoho hammoho le ho ntšoa ha batch ho li-platform tse fapaneng tse phahameng.
■ Lihlahisoa tse fumanoeng ke lisebelisoa li fihlela litlhoko tsa liteko tsa tlhahlobo ea noka le tlhahlobo ea NGS.
■ Sehlahisoa sena se loketse lisampole tsa serum le plasma tse nang le molumo oa 2-5 ml.
Lihlahisoa tsohle li ka fetoloa bakeng sa ODM / OEM. Bakeng sa lintlha,ka kopo tlanya Customized Service (ODM / OEM)
cfDNA e ntšitsoe ka TIANGEN Magnetic Serum / Plasma DNA Maxi Kit le sehlahisoa se amehang ho Mofani oa M ho tsoa ho li-sampuli tsa 2 ml tsa serum. Setšoantšo sa 1: Etsa tlhahlobo ea Agilent2100 kamora kaho ea laeborari ea cfDNA. Tafole ea 1: Qubit HS: Khokahano ea DNA e fumanoe ka kutlo e phahameng ea Qubit. Boleng ba Ct: liphetho tse ngata tsa qPCR tse nang le li-primer tsa globulin. Agilent 2100: Ho tsepamisoa mohopolo ho 300 bp boemo ba moaho oa laeborari ea DNA ho hlahlojoe le Agilent 2100 Chip. |
A-1 Lisele tsa vaerase kapa vaerase e tlase sampoleng e qalang -E ruisa bongata ba lisele kapa livaerase.
A-2 Lysis e sa lekanang ea lisampole -Sampole ha e so tsoakane hantle le buffer ea lysis. Ho khothalletsoa ho kopanya ka botlalo ka pulse-vortexing makhetlo a 1-2. —Leseli e sa lekanang ea lisele e bakoang ke ho fokotseha ha tšebetso ea proteinase K. Ho khothalletsoa ho seha lisele ka likotoana tse nyane ebe o eketsa nako ea ho hlapa ho tlosa masalla a lysate.
A-3 Phatlalatso e sa lekaneng ea DNA. -Ha ho ethanol kapa liperesente tse tlase ho e-na le 100% ea ethanol e ileng ea eketsoa pele lysate e fetisetsoa ho kholomo ea spin.
A-4 Boleng ba pH ba elution buffer bo tlase haholo. - Fetola pH hore e be lipakeng tsa 8.0-8.3.
E setseng ea ethanol ka eluent.
-Ho na le masalla a hlatsoang sesupa-tsela PW lehloeng. Ethanol e ka tlosoa ka ho kenya centrifuging spin ea kholomo bakeng sa 3-5 min, ebe e beha mocheso oa kamore kapa 50 ℃ incubator bakeng sa 1-2 min.
A-1 Sampole ha e ncha. —Khetholla sampole e ntle ea DNA e le taolo ea ho bona hore na DNA e samporeng e senyehile.
A-2 Pele ho kalafo e fosahetseng. —E bakoa ke ho sila metsi a naetrojene e feteletseng, ho fumana mongobo hape kapa sampole e ngata haholo.
Li-prereatment li lokela ho fapana bakeng sa mehlala e fapaneng. Bakeng sa mehlala ea semela, etsa bonnete ba hore u sila ka botlalo ka naetrojene ea metsi. Bakeng sa disampole tsa liphoofolo, homogenate kapa sila ka botlalo ka naetrojene ea metsi. Bakeng sa mehlala e nang le mabota a sele eo ho leng thata ho e roba, joalo ka baktheria ea G + le tomoso, ho kgothaletswa hore ho sebelisoe lysozyme, lyticase kapa mekhoa ea mochini ho roba mabota a sele.
4992201/4992202 Plant Genomic DNA Kit e sebelisa mokhoa o sebelisang kholomo o hlokang chloroform bakeng sa ho ntšoa. E loketse haholo-holo mefuta e fapaneng ea limela, hammoho le phofo e ommeng ea semela. Hi-DNAsecure Plant Kit le eona e thehiloe holima kholomo, empa ha ho hlokahale hore e ntšoe phenol / chloroform, ee boloke e se na chefo. E loketse limela tse nang le polysaccharides e phahameng le polyphenol. 4992709/4992710 DNAquick Plant System e sebelisa mokhoa o sebelisang metsi. Phenol / chloroform ha e hlokehe hape. Tsamaiso ea tlhoekiso e bonolo ebile e potlakile e se na moeli bakeng sa litekanyo tsa sampole e qalang, kahoo basebelisi ba ka fetola chelete ka mokhoa o feto-fetohang ho latela litlhoko tsa liteko. Boholo bo boholo ba likhechana tsa gDNA bo ka fumaneha ka chai e ngata.
Ho ntšoa ha DNA ea mali a mali ho ka etsoa ho sebelisoa li-reagents tse fanoeng ka har'a lisebelisoa tsena tse peli ka ho fetola protocol ho latela taelo e ikhethang ea ho ntšoa ha mali a DNA. Kopi e bonolo ea protocol ea ho ntša mali ea clot ea mali e ka fanoa ha ho kopuoa.
Emisa sampole e ncha ka 1 ml PBS, letsoai le tloaelehileng kapa buffer ea TE. Ka ho feletseng homogenize sampole ke homogenizer le bokella precipitate ho ea tlase ea tube, ke centrifuging. Lahla matla a phahametseng tlhaho, 'me u nchafatse sepakapaka ka 200 μl buffer GA. Tlhoekiso e latelang ea DNA e ka etsoa ho latela taelo.
Bakeng sa tlhoekiso ea gDNA ka lisele tsa lero la mali, serum le 'mele, ho khothaletsoa TIANamp Micro DNA Kit. Bakeng sa tlhoekiso ea vaerase gDNA ho tsoa disampoleng tsa serum / plasma, ho khothaletsoa TIANamp Virus DNA / RNA Kit. Bakeng sa tlhoekiso ea baktheria gDNA ho tsoa disampoleng tsa serum le plasma, ho khothaletsoa TIANamp Bacteria DNA Kit (lysozyme e lokela ho kenyelletsoa bakeng sa baktheria e ntle). Bakeng sa mehlala ea mathe, Hi-Swab DNA Kit le TIANamp Bacteria DNA Kit lia khothaletsoa.
Sesebelisoa sa Semela sa DNAsecure kapa Sisteme ea Semela sa DNAquick se khothalelitsoe molemong oa ho ntša fungal genome. Bakeng sa ho ntša tomoso ea genome, ho khothalletsoa TIANamp Yeast DNA Kit (lyticase e lokela ho itokisetsa).
Ho tloha ha e theoa, fektheri ea rona e ntse e nts'etsapele lihlahisoa tsa maemo a pele ka ho latela molao-motheo
ea boleng pele. Lihlahisoa tsa rona li fumane botumo bo botle indastering ebile li na le boleng bo phahameng har'a bareki ba bacha le ba khale ..